本文使用 Agilent G6410AA 三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀 進(jìn) 行了證實 100 種農(nóng)藥在蔬菜和水果樣品中是否存在的分析方法 學(xué)研究。在包含兩個時間段的一次色譜操作中，每種母體化合 物監(jiān)測一種轉(zhuǎn)變。方法的靈敏度滿足歐盟委員會食品監(jiān)測計劃 提出的最大殘留量 (MRLs) 的要求。將本方法應(yīng)用于不同種 類的蔬菜和水果的分析，包括柑桔、西紅柿和青椒，以考察方 法的分析性能，結(jié)果表明基質(zhì)沒有干擾或影響很小。線性范圍 超過兩個數(shù)量級 (r > 0.99)。本研究揭示了將三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀 應(yīng)用于蔬 菜和水果中農(nóng)藥多種殘留物的日常定量分析的潛在價值。
 

　　引言 近年來，對商品中最大殘留量 (MRLs) 的規(guī)定越來 越嚴(yán)格。為了滿足對健康的要求，歐盟委員會 (EU) 對蔬菜中低含量的農(nóng)藥作出了新的指示。對于準(zhǔn)備用 作生產(chǎn)嬰兒食品的水果和蔬菜，要求其所含所有農(nóng)藥 的 MRL 為 10 µg/kg，沒有提出規(guī)定的化合物同樣也 要求達(dá)到 10 µg/kg 的低 MRLs。低的 MRLs 促進(jìn)了 更靈敏分析方法的開發(fā)以滿足復(fù)雜樣品分析的需要。 從這種意義上講，具有三重串聯(lián)四極桿的液相色譜串 聯(lián)質(zhì)譜 (LC-MS-MS) 采用多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM) 模式已 經(jīng)成為目前應(yīng)用廣泛的技術(shù)用于食品中農(nóng)藥的監(jiān)測 和定量，文獻(xiàn)已有詳盡的報道。另一方面，高解析能 力的質(zhì)譜技術(shù)，如飛行時間質(zhì)譜 (TOF-MS) 近來也已 用于篩選。然而，使用三重串聯(lián)四極桿作為檢測技術(shù)， 方法學(xué)簡單且具有檢出限低和 MS/MS 功能，這些優(yōu) 勢使該技術(shù)成為一種有價值的手段可以在的實驗室用于常規(guī)監(jiān)測計劃。對于這些類型的管理機構(gòu)， 缺少能掌握更精密復(fù)雜技術(shù)，如 TOF-MS 的高技術(shù) 人員，因此，易于使用有時是必須的。三重串聯(lián)四極 桿技術(shù)不是一種有待驗證才能用于檢測目的的新技術(shù)， 用于常規(guī)分析的基礎(chǔ)已經(jīng)很好地建立起來。
 

　　本文研究考察了新的安捷倫三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜 儀用于水果和蔬菜中農(nóng)藥的分析。選擇此研究課題是 由于這些化合物與其在食品中的大量使用具有相關(guān)性。 QQQ 的檢測靈敏度很容易滿足檢測食物中農(nóng)藥含量 的法規(guī)要求。
 

　　實驗內(nèi)容 樣品制備 農(nóng)藥分析標(biāo)準(zhǔn)品購自 Ehrenstorfer 博士 (德國， Ausburg)。各種農(nóng)藥的儲備液 (約 1000 µg/ml)，根 據(jù)每種化合物的溶解度分別采用純乙腈或甲醇配制并 在 -18 ° C 下儲存。取上述儲備液，通過用乙腈和水稀 釋配制標(biāo)準(zhǔn)工作液。 蔬菜樣品從當(dāng)?shù)氐氖袌霁@得，“空白”蔬菜和水果提 取物用于制備基質(zhì)匹配的標(biāo)準(zhǔn)品用于方法學(xué)驗證。在 已報道的研究中，已有用 QuEChERS 方法提取了蔬 菜和一種水果(青椒、西紅柿和柑桔)兩種不同類型 基質(zhì)的報道 [1]。向蔬菜提取物中加入標(biāo)準(zhǔn)品并混合 均勻制備成不同濃度的樣品(范圍為 2 到 100 µg/kg) 并依次進(jìn)行 LC/MS/MS 分析。
 

　　結(jié)果與討論 LC/MS/MS 條件的優(yōu)化 目前，已經(jīng)完成了每一種化合物最佳 MRM transition 的研究，進(jìn)行條件優(yōu)化時將被測物分組進(jìn)樣(每次進(jìn) 樣約 10 種待測成分)，樣品濃度約為 10 µg/mL。改 變碰撞能量(5，10，15，20 和 25 V)，考察了碰撞 能量的影響。選擇在譜圖中能給出主要碎片離子最佳 靈敏度且依照通用規(guī)則保留 10% 母體化合物的能量 為最佳能量。對于每一種目標(biāo)化合物，僅有一種碎片 離子被選作最大豐度子離子。研究結(jié)果示于表 1。
 

　　方法中包括 MRM transition，駐留時間為 15 msec， 并在一次色譜操作中分成兩個不同的時間段進(jìn)行記錄 (每個時間段大約包括一半樣品)。圖 1 為所有被研究 的化合物進(jìn)樣量為 100 pg 時色譜圖。根據(jù)每種成分 各自的質(zhì)子化分子和子離子的 MRM transition，將 每一種目標(biāo)成分的提取離子色譜圖疊加在圖中。
 

　　線性和檢出限 線性是通過分析 5 個不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液而獲得，濃 度范圍相應(yīng)于進(jìn)樣量2-100 pg。例如，莠去津(atrazine) 的標(biāo)準(zhǔn)曲線示于圖 2。從圖中可以看出，線性范圍跨 越很寬的濃度范圍，相關(guān)系數(shù)為 0.998。其它被測成 分也得到了相似的研究結(jié)果。
 

　　檢出限通過測定濃度相應(yīng)于信噪比為 3 的標(biāo)準(zhǔn)溶液來 估計。實驗結(jié)果也列于表 1。檢出限由測定三嗪 類 (triazines) 農(nóng)藥獲得(柱上為 100 fg 到 2 pg)，而 氟草煙 (fluoroxypyr) 和多殺菌素 D (spinosad D) 的 檢出限最高(大于 100 pg)。
 

　　蔬菜基質(zhì)的應(yīng)用 為了驗證本法用于真實樣品分析的適用性，分析了三 種不同基質(zhì)，即青椒、西紅柿和柑桔，兩種濃度水平 (10 和 100 µg/kg) 下的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)品。在青椒基質(zhì) 中加入混合農(nóng)藥至 10 µg/kg(即進(jìn)樣 10 pg)所進(jìn)行 的分析示于圖 3。正如從樂果 (dimethoate) 和亞托敏 (azoxystrobin) 這兩種農(nóng)藥的 MS/MS 提取子離子色 譜圖看到的那樣，依據(jù) MRM transition 的選擇性可 以很容易地從這些復(fù)雜基質(zhì)中鑒定該類化合物，這樣 就可以滿足歐盟指令強制實行的規(guī)定量的要求?？?nbsp;之，本法獲得的 LOD 能夠滿足現(xiàn)行歐盟條例強制執(zhí) 行的相關(guān) MRLs 的要求。