摘要本應(yīng)用簡報介紹了一種采用液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)測定化妝品中禁用物質(zhì)秋水仙胺含量的方法。該方法操作簡便、靈敏度高；在 0.1–200 µg/L 的濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)出良好的線性；在化妝品空白基質(zhì)中的兩種加標(biāo)濃度下，目標(biāo)化合物的回收率在 93%–111% 之間，且六次平行測定結(jié)果的相對標(biāo)準偏差在 1.5%–7.3% 之間，表現(xiàn)出良好的準確度和精密度。該方法適用于化妝品中秋水仙胺的檢測。
 

　　前言化妝品作為美容和個人護理產(chǎn)品，直接影響消費者的皮膚健康和整體福祉。近年來，隨著消費者對安全、健康的日益關(guān)注，越來越多化妝品中開始添加純植物提取的中草藥成分，以實現(xiàn)天然保濕、抗炎等護膚目的。但是，所添加的中草藥成分在產(chǎn)生功效的同時，也有可能引入具有毒性的生物堿類化合物，如其鹽類。如果消費者長期使用含有此類生物堿類化合物的化妝品，會損傷肝、腎和骨髓等器官，引起嘔吐、腹瀉、腹痛、胃腸等不良反應(yīng)[1]。為保障消費者的健康和權(quán)益，監(jiān)管機構(gòu)嚴禁化妝品中使用其衍生物秋水仙胺。目前，針對化妝品中秋水仙胺的檢測方法包括高效液相色譜法 (HPLC)、氣質(zhì)聯(lián)用法 (GC-MS) 等。其中，HPLC 法操作簡單，但選擇性差、靈敏度有限，不適用于痕量檢測；GC-MS 法選擇性高，但需要對樣品進行衍生，操作復(fù)雜，重現(xiàn)性差。相比之下，液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用法 (LC-MS/MS) 作為一種高效、靈敏且可靠的分析技術(shù)，正逐漸成為化妝品中秋水仙胺的檢測方法[2]。本文介紹了一種采用 Agilent 1290 Infinity II 液相色譜/6470 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)檢測化妝品中秋水仙胺的方法。該方法簡單、靈敏度高且準確可靠，適用于準確測定化妝品中的痕量秋水仙胺。
 

　　實驗部分試劑和樣品實驗用甲醇、乙腈、正己烷、甲酸均為色譜純，購自美國 Fisher公司；乙酸銨溶液購自德國 Merck 公司；實驗用水為經(jīng) Milli-Q 系統(tǒng)凈化的超純水(電阻率 18.2 MΩ)；秋水仙胺標(biāo)準品購自天津阿爾塔科技公司；實驗用化妝品樣品購自北京市場。儀器和設(shè)備采用 Agilent 1290 Infinity II 液相色譜/6470 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)；以及渦旋混勻器(德國 IKA 公司)、KQ-500B 型超聲儀(昆山市超聲器有限公司)、TD5A-WS 離心機(湖南湘儀離心機儀器有限公司)和 Milli-Q 超純水裝置(德國 Merck 公司)
 

　　樣品前處理稱取 1.0 g 樣品，準確加入 10 mL 用正己烷飽和的甲醇乙腈 (1/1)溶液，渦旋混勻后，超聲提取 15 min；然后以 9500 r/min 離心5 min，取上清液 5 mL 于 10 mL 容量瓶中，用水定容至刻度，混勻；取 5 mL 加入 15 mL 離心管中，加入 5 mL 正己烷，渦旋混合；然后以 9500 r/min 離心 5 min，棄去上層，并將下層清液用過濾膜過濾后待測[3]。
 

　　液相色譜條件色譜柱： Agilent Eclipse Plus C18, 2.1 × 100 mm,1.8 µm(部件號 959758-902)柱溫： 40 °C進樣量： 2 µL流動相： A) 含 0.1% 甲酸和 5 mmol/L 乙酸銨的水溶液；B) 甲醇流速： 0.3 mL/min梯度程序： 時間 (min) B (%) 0 10 5 100 7 100后運行時間：3 min
 

　　質(zhì)譜條件離子模式： ESI，正離子模式干燥氣溫度： 300 °C干燥氣流速： 8 L/min鞘氣溫度： 350 °C鞘氣流速： 11 L/min霧化器壓力： 25 psi毛細管電壓： 3000 V噴嘴電壓： 500 V多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM) 采集參數(shù)：見表 1
 

　　質(zhì)譜與色譜條件的優(yōu)化秋水仙素屬于生物堿類化合物，在電噴霧離子源正離子模式下容易產(chǎn)生 [M+H]+ 準分子離子峰。采用濃度為 1 mg/L 的標(biāo)準溶液，對質(zhì)譜離子源和多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM) 離子對條件進行優(yōu)化。優(yōu)化后的 MRM 參數(shù)如表 1 所列。確定質(zhì)譜條件后，選取色譜柱 Eclipse Plus C18 和 PoroshellEC-C18，考察以水/甲醇和水/乙腈作為流動相、以甲酸和乙酸銨作為添加劑時的分離效果。綜合考慮分離度、峰形和分析效率等因素，最終選取 Eclipse Plus C18 色譜柱和含 0.1% 甲酸和5 mmol/L 乙酸銨的水溶液/甲醇流動相體系。經(jīng)梯度優(yōu)化后，所得秋水仙胺標(biāo)樣 (10.0 µg/L) 的 MRM 提取色譜圖如圖 1 所示。從圖中可以看出，秋水xian堿和秋水仙胺得到有效分離，峰形良好，且不受基質(zhì)明顯干擾。
 

　　線性范圍采用外標(biāo)法進行定量，在 0.005–200 µg/L 的濃度范圍內(nèi)考察方法線性。結(jié)果如表 2 所示。從表中可以看出，秋水xian堿和秋水仙胺分別在 0.01–100 µg/L 和 0.01–200 µg/L 的濃度范圍內(nèi)獲得了良好的線性響應(yīng)，線性相關(guān)系數(shù) (R2) 高于 0.997，表明該方法具有較寬的線性范圍。
 

　　方法準確度和精密度取空白乳液化妝品和膏狀化妝品，分別以 2 µg/kg 和 20 µg/kg的濃度添加秋水xian堿和秋水仙胺，并且在每個加標(biāo)水平下重復(fù)測定 6 次，對方法準確度和精密度進行評估。結(jié)果如表 3 所列。從表中可以看出，在低加標(biāo)濃度下，目標(biāo)化合物的回收率在93.2%–110.7% 之間，相對標(biāo)準偏差在 4.3%–7.3% 之間；在高加標(biāo)濃度下，目標(biāo)化合物的回收率在 93.5%–102.1% 之間，相對標(biāo)準偏差在 1.5%–3.2% 之間，表明該方法具有良好的準確度和精密度
 

　　實際樣品分析使用所開發(fā)的方法對購自北京市場的 6 種不同品牌的化妝品(包括祛痘消炎膏霜類 3 個、清潔護膚乳液類 3 個)進行分析，在所有樣品中均未檢出秋水xian堿和秋水仙胺。
 

　　結(jié)論本文介紹了一種采用液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用法測定化妝品中秋水xian堿和秋水仙胺的方法。該方法操作簡便、靈敏度高、線性范圍寬，且具有優(yōu)異的準確度和精密度，適用于測定不同類型化妝品中的痕量秋水xian堿和秋水仙胺。